姬松茸的建堆发酵与双孢蘑菇一样。将稻草、秸秆等或棉籽皮浸透水后与畜禽粪等分层铺撒均匀建堆，一般建堆上宽1.2米，下宽1.5米，高1.3米。堆料后的3～4天，堆温通常可达70℃左右。堆温的测定一般以圆柱形温度计插入料堆深约33厘米处为标准。5～7天后，堆温就会下降，此时应翻堆。翻堆的目的是改善料层的空气条件，散发堆内的废气，调整料堆的水分，同时添加化肥和石膏粉，改善发酵条件，让微生物继续生长繁殖，更好地促使堆温回升，加速粪草分解，达到均匀腐熟。
第一次翻堆时加入尿素、硫酸铵等化肥并充分搅拌匀，在微生物的作用下，通过发酵变成适合姬松茸的氮源。5天后进行第二次翻堆，再按4天、3天的间隔翻堆5次， 共发酵24天左右。为了使堆料发酵均匀，翻堆时应把中间培养料翻到外面，把外层培养料堆进中间。发酵后培养料以达到棕褐色，手拉纤维易断为度。堆制发酵后培养料含水量约为60%～75%，手抓一把培养料用力挤，指缝有二三滴水即为含水量适宜。将pH值调至9。为了制作均匀、完全成熟、高质量的培养料，翻堆非常重要，这是姬松茸产量高低的先决条件。
