⑴栽培原料
鸡腿菇是草腐菌，秸秆、棉籽壳、废棉等都是鸡腿菇的培养材料，但要求先发酵腐熟，且发酵的质量与其产量有直接关系。另外，栽培草菇、金针菇的下脚废料也可作为鸡腿菇的培养料，而且不需要发酵，直接打碎就可装袋。
⑵栽培料发酵
先将棉籽壳或废棉充分预湿透，然后建堆发酵，堆宽1.5米，高1.5米，长度不限。共翻堆3次，程式5-4-3。翻堆时要充分耙松打碎，翻堆后要在料堆腰部打通气洞，通气洞间距40厘米，防止料堆发生厌气。发酵好的料应显深咖啡色，有特殊的菌香味。
⑶培养料配方
A) 棉籽壳（腐熟料）80公斤、麸皮20公斤、石灰4.5公斤，料水比1：1.1～1.2。
B) 棉籽壳（腐熟料）80公斤、废棉（腐熟料）40公斤、玉米粉4公斤、麸皮6公斤、石灰4.5公斤，料水比1：1.1～1.2。
C) 草菇菌糠60公斤、棉籽壳20公斤、麸皮20公斤、石灰3.5公斤，料水比1：1.1～1.2。
D) 金针菇菌糠50公斤、棉籽壳30公斤、麸皮20公斤、石灰5公斤，料水比1：1.1～1.2。
⑷装袋、灭菌、冷却、接种
采用20×45厘米的塑料简筒，将筒袋一头用塑料丝扎紧，然后从另一头装进培养料，要求袋料松紧适度，即两头紧、中间松，袋壁紧，袋心松，料装好后扎紧袋口。灭菌方法与原种要求相同，由于菌袋较大，灭菌的时间应适当延长，否则灭菌不彻底。灭菌的菌袋放到接种室冷却至28℃，接种前须用臭氧发生器进行消毒灭菌，20分钟以后即可在接种室进行开放式接种。菌袋两头接种，并放置无菌棉塞扎好，有利菌袋内外气体交换。
